在腫瘤免疫治療領(lǐng)域，靶向CD19的CAR-T細(xì)胞療法在治療B細(xì)胞惡性腫瘤方面取得了革命性的成功。例如全球獲批上市的CAR-T療法Kymriah (tisagenlecleucel)，于2017年8月獲美國(guó)FDA批準(zhǔn)，就是一款靶向CD19的First in Class產(chǎn)品，開(kāi)創(chuàng)了CAR-T治療的新時(shí)代而這一成功背后，一個(gè)名為FMC63的單鏈可變片段作為其核心識(shí)別元件，發(fā)揮著的作用。

FMC63是一種特異性靶向人CD19抗原的單克隆抗體衍生的單鏈可變片段。CD19作為一種在正常B細(xì)胞和大多數(shù)B系惡性腫瘤細(xì)胞表面廣泛且穩(wěn)定表達(dá)的蛋白，是CAR-T療法具吸引力的理想靶點(diǎn)。FMC63 scFv以其高親和力和特異性，能夠精準(zhǔn)識(shí)別并結(jié)合CD19，從而充當(dāng)CAR-T細(xì)胞的“導(dǎo)航頭"，引導(dǎo)T細(xì)胞精準(zhǔn)定位并清除腫瘤細(xì)胞。

圖 1 Kymriah® CAR-T結(jié)構(gòu)示意圖

在 CAR-T 治療中的應(yīng)用 (Application in CAR-T Therapy):

CAR 設(shè)計(jì)的特異性識(shí)別單元: 在為CAR-T療法設(shè)計(jì)CAR時(shí)，通常需要一個(gè)胞外識(shí)別域來(lái)結(jié)合腫瘤抗原。這個(gè)識(shí)別域可以是單克隆抗體的可變區(qū)（variable region）。因此，Anti-FCM63抗體的可變區(qū)（或其一部分，如scFv - single-chain variable fragment）可以直接被整合到CAR結(jié)構(gòu)中，使其能夠特異性地靶向FCM63。

研究 CAR-T 細(xì)胞與 FCM63 的相互作用: Anti-FCM63抗體可以用來(lái)研究CAR-T細(xì)胞是如何識(shí)別和結(jié)合FCM63的，以及這種結(jié)合對(duì)CAR-T細(xì)胞功能的影響。

技術(shù)核心：FMC63 scFv的結(jié)構(gòu)與功能優(yōu)勢(shì)

FMC63 scFv是通過(guò)基因工程技術(shù)，將FMC63單克隆抗體的重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)通過(guò)一個(gè)短肽連接子連接而成。這種結(jié)構(gòu)使其既保留了完整抗體與CD19結(jié)合的特異性和親和力，又具有分子量小、易于基因操作和表達(dá)的優(yōu)點(diǎn)。

其特性使其成為構(gòu)建CAR-T療法的結(jié)合域：

• 高特異性與親和力：FMC63 scFv能特異性地與人類CD19的胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合，且不與其他無(wú)關(guān)抗原發(fā)生交叉反應(yīng)，這種精準(zhǔn)識(shí)別是CAR-T療法有效性和安全性的基石。

• 穩(wěn)定性：FCM63的結(jié)合表位不易因蛋白構(gòu)象變化而丟失。

• 空間可及性：位置利于CAR分子與靶細(xì)胞表面的CD19有效結(jié)合，不易被空間位阻干擾。

• 經(jīng)臨床驗(yàn)證的工作效率：由FMC63 scFv構(gòu)建的CAR-T細(xì)胞（例如已獲批的Kymriah和Yescarta）在臨床試驗(yàn)和臨床應(yīng)用中，已證明了其在治療復(fù)發(fā)/難治性B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病和彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤中的療效，能夠誘導(dǎo)深度的和持久的緩解。

應(yīng)用與展望：超越CAR-T的潛力

目前，F(xiàn)MC63 scFv最主要的應(yīng)用是作為構(gòu)建第二代、第三代乃至更先進(jìn)CD19靶向CAR-T的核心模塊。然而，其應(yīng)用潛力并不僅限于此：

• 雙特異性抗體開(kāi)發(fā)：可作為構(gòu)建靶向CD19的雙特異性T細(xì)胞銜接器的功能單元。

• 其他細(xì)胞療法：其同樣適用于構(gòu)建CAR-NK等其他類型的免疫細(xì)胞療法。

• 診斷與成像：可用于開(kāi)發(fā)伴隨診斷試劑或腫瘤體內(nèi)成像探針。

FMC63 scFv作為一款經(jīng)過(guò)千錘百煉的分子工具，是推動(dòng)CD19靶向CAR-T療法從實(shí)驗(yàn)室走向臨床，并最終成功商業(yè)化的關(guān)鍵因素之一。它不僅是CAR-T技術(shù)的核心引擎，更是連接基礎(chǔ)免疫學(xué)與臨床轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)。隨著細(xì)胞治療技術(shù)的不斷演進(jìn)，F(xiàn)MC63 scFv將繼續(xù)在下一代更安全、更高效的免疫治療策略中扮演至關(guān)重要的角色。

斯達(dá)特提供FMC63抗體，應(yīng)用于流式實(shí)驗(yàn)，可用于針對(duì)CD19靶點(diǎn)的CAR 檢測(cè)。

FMC63 Recombinant Rabbit mAb (S-2163-77)(貨號(hào)：S0B5521）

Flow cytometric analysis of CAR (FMC63 scFv) transfected 293T (Human embryonic kidney epithelial cell (Right panel) or untrasfected 293T (Left panel) labelling FMC63 antibody at 1/2000 (0.1 μg) dilution. Goat Anti-Rabbit IgG Alexa Fluor® 488 was used as the secondary antibody.

FMC63 Recombinant Rabbit mAb (PE Conjugate) (S-2163-77)（貨號(hào)：S0B5817）

Flow cytometric analysis of FMC63 expression on CAR (FMC63 scFv) transfected 293T (Human embryonic kidney epithelial cell. CAR (FMC63 scFv) transfected 293T were stained with PE Rabbit IgG Isotype Control (Left panel) or SDT PE Rabbit Anti-FMC63 Antibody (Right panel) at 5 μl/test. Flow cytometry and data analysis were performed using BD FACSymphony™ A1 and FlowJo™ software.

斯達(dá)特FMC63 抗體列表

杭州斯達(dá)特是優(yōu)寧維旗下品牌，志在為全球生命科學(xué)行業(yè)提供優(yōu)質(zhì)的抗體、蛋白、試劑盒等產(chǎn)品及研發(fā)服務(wù)。依托多個(gè)開(kāi)發(fā)平臺(tái)：重組兔單抗、重組鼠單抗、快速鼠單抗、重組蛋白開(kāi)發(fā)平臺(tái)（E.coli,CHO,HEK293,InsectCells）、一步法ELISA平臺(tái)，PTM泛修飾抗體平臺(tái)。

CAR-T靶向CD19治療背后的隱形英雄：解碼FMC63