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產品型號:UA070015
更新時間:2025-12-17
廠商性質:生產廠家
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產品名稱: Avi標簽蛋白生wu素標記試劑盒
產品貨號: UA070015
產品描述
Avi標簽蛋白生wu素標記試劑盒是一種用于對Avi標簽融合蛋白進行位點特異性生wu素標記的酶學試劑盒。其核心組分是來源于大腸桿菌的重組生wu素蛋白連接酶(BirA)。在ATP存在下,BirA能夠高效且特異地催化生wu素共價連接到Avi標簽的特定賴氨酸殘基上,實現蛋白的單點、均一標記。標記后的蛋白可通過其生wu素與鏈霉親和素之間超高親和力(Kd ≈ 10?1? M) 的結合,廣泛應用于蛋白質互作、活細胞成像、細胞分選等前沿研究。
產品特性
核心酶: 重組BirA連接酶
純度: >95%(經SDS-PAGE和HPLC驗證)
分子量: 約35 kDa
內毒素: <0.5 EU/μg
性狀: 液體(50%甘油儲存液)
產品優(yōu)勢
位點特異性標記:確保生wu素精確、均一地標記在Avi標簽的特定位點,避免隨機標記導致的蛋白功能干擾或結合不均一。
標記效率高:優(yōu)化反應體系,推薦條件下(40 μM Avi標簽蛋白,2 μg BirA,37°C)可在30-60分鐘內完成高效標記。
操作流程明確:提供詳細的推薦步驟和配方,用戶可根據自身蛋白濃度靈活優(yōu)化反應時間(30分鐘至過夜)。
應用價值極gao:生wu素-鏈霉親和素系統(tǒng)是迄今已知zui強的非共價相互作用之一,標記后的蛋白可用于Pull-down、SPR、BLI、超分辨率顯微鏡等多種高要求技術平臺。
經文獻驗證:產品背景引用了《Nature Protocols》等quan威期刊的相關方法學論文,技術成熟可靠。
應用
制備用于蛋白質-蛋白質相互作用研究的生wu素化誘餌蛋白
用于基于表面等離子共振或生物膜干涉技術的生物分子互作分析
活細胞或固定細胞中目標蛋白的超高分辨率成像與定位
細胞分選或基于親和力的蛋白純化
使用說明
推薦反應條件:
Avi標簽蛋白濃度:建議 ≥ 40 μM(以獲得最jia標記效率)。
酶量:推薦每10 nmol Avi標簽蛋白使用2 μg BirA。
溫度與時間:37°C孵育30-60分鐘,或室溫孵育60-90分鐘。低濃度蛋白可延長至過夜。
反應體系:參照產品“操作步驟"中的表格,按比例混合Avi標簽蛋白、10×反應緩沖液(A/B/C)、BirA酶和無核酸酶水,總體積通常為250 μL。
標記效率檢測:反應完成后,可通過鏈霉親和素下拉實驗或商業(yè)化的生wu素定量試劑盒來評估標記效率。
儲存:BirA酶及緩沖液請于-20°C保存,避免反復凍融。
保存條件
自收貨之日起,于-20℃保存條件下,所有組分可穩(wěn)定保存12個月。
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