產(chǎn)品名稱(chēng)： PNGase F
產(chǎn)品貨號(hào)： UA070014

產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品為通過(guò)大腸桿菌重組表達(dá)并純化的肽N-糖苷酶F，帶有His標(biāo)簽。PNGase F是一種高效、特異的酰胺水解酶，能催化絕大多數(shù)N-連接糖鏈在天冬酰胺殘基處的wan全切除，是糖蛋白結(jié)構(gòu)解析、蛋白質(zhì)組學(xué)、抗體工程及生物藥質(zhì)量分析中的核心工具酶。本品以高濃度液體形式提供，并配套包含變性緩沖液、反應(yīng)緩沖液和去垢劑的完整去糖基化試劑盒，滿(mǎn)足不同條件下的實(shí)驗(yàn)需求。

產(chǎn)品特性

• 酶形式： 重組肽N-糖苷酶F

• 來(lái)源： 腦膜膿毒性伊麗莎白菌

• 表達(dá)宿主： 大腸桿菌

• 標(biāo)簽： His 標(biāo)簽

• 純度： >95%（SDS-PAGE驗(yàn)證）

• 比活性： 100，000 U/mL

• 性狀： 液體（50%甘油儲(chǔ)存液）

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

• 超高比活性：活性高達(dá)100，000 U/mL，使用微量即可實(shí)現(xiàn)高效、che底的去糖基化。

• 底物譜廣泛：可切割高甘露糖型、雜合型和復(fù)雜型在內(nèi)的絕大多數(shù)N-連接聚糖（核心α1-3巖藻糖修飾的除外）。

• 提供完整試劑盒：產(chǎn)品包含PNGase F酶、10×反應(yīng)緩沖液、10×變性緩沖液和10× NP-40，提供完整解決方案。

• 操作方案靈活：提供針對(duì)變性蛋白（1小時(shí)快速反應(yīng)）和非變性蛋白（4-24小時(shí)溫和反應(yīng)）兩種詳細(xì)、優(yōu)化的操作流程。

• 應(yīng)用成熟可靠：是糖蛋白研究的金標(biāo)準(zhǔn)酶，在抗體表征、生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)和生物制藥開(kāi)發(fā)中應(yīng)用廣泛。

應(yīng)用

• 糖蛋白（尤其是抗體類(lèi)藥物）的去糖基化處理，用于SDS-PAGE遷移率分析或質(zhì)譜分析。

• 蛋白質(zhì)組學(xué)研究中，去除糖鏈以提高酶解效率和肽段鑒定率。

• 研究糖基化對(duì)蛋白結(jié)構(gòu)、功能及穩(wěn)定性的影響。

• 生物制藥工藝中，分析治療性蛋白的糖型。

• 作為工具酶用于糖生物學(xué)相關(guān)機(jī)制研究。

使用說(shuō)明

• 酶活定義：1個(gè)活性單位（U）指在37°C下，10 μL反應(yīng)體系中，1小時(shí)內(nèi)能從10 μg變性RNase B上切除>95%糖鏈所需的酶量。

• 快速去糖基化（推薦用于變性蛋白）：

1. 取1-20 μg糖蛋白，加入1 μL 10×變性緩沖液，補(bǔ)水至10 μL，100°C加熱變性10-20分鐘。

2. 冷卻后，加入2 μL 10×反應(yīng)緩沖液、2 μL 10% NP-40和5 μL水，混勻。

3. 加入1 μL PNGase F，37°C孵育1小時(shí)。

4. 進(jìn)行SDS-PAGE或其他分析。

• 非變性去糖基化（用于天然蛋白）：將1-20 μg糖蛋白與2 μL 10×反應(yīng)緩沖液、2-5 μL PNGase F及補(bǔ)水至20 μL混合，37°C孵育4-24小時(shí)。

• 儲(chǔ)存：請(qǐng)于-20°C至-70°C保存，避免反復(fù)凍融。產(chǎn)品含50%甘油，-20°C不凍結(jié)。

• 關(guān)鍵注意事項(xiàng)：避免使用含SDS的緩沖液，因其會(huì)抑制酶活。對(duì)于含有核心α1-3巖藻糖的稀有糖型無(wú)效。

保存條件
自收貨之日起，于-20°C至-70°C條件下，可穩(wěn)定保存12個(gè)月。

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