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技術(shù)文章
2025-711
前言蛋白標(biāo)簽(ProteinTag)是一種與目的蛋白融合表達(dá)的多肽或蛋白,用于輔助目的蛋白的表達(dá)、檢測、示蹤和純化等。常見的標(biāo)簽蛋白根據(jù)用途分為多肽標(biāo)簽(如Flagtag、Histag)、親和標(biāo)簽(如MBP、GST)和熒光標(biāo)簽(如mCherry)。標(biāo)簽抗體(TagAntibody)是一類特異性抗體,能夠識(shí)別并結(jié)合到融合蛋白上的特定標(biāo)簽序列,用于檢測和純化目標(biāo)蛋白,廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)表達(dá)、定位、相互作用和功能研究等領(lǐng)域。標(biāo)簽抗體與瓊脂糖珠結(jié)合后,可以有效地從細(xì)胞裂解液中拉下與之結(jié)...
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2025-710
HIS標(biāo)簽蛋白是一種常用于分子生物學(xué)中的融合標(biāo)簽,用于對(duì)重組蛋白的純化、鑒定、分析等操作。HIS標(biāo)簽通常是由6個(gè)連續(xù)的組氨酸殘基(His)組成的短肽序列,通常位于目標(biāo)蛋白的N端或C端。通過與鎳(Ni)離子結(jié)合,HIS標(biāo)簽提供了一種高效、簡便的純化方法,廣泛應(yīng)用于蛋白表達(dá)、純化和檢測等方面。HIS標(biāo)簽蛋白的優(yōu)勢:1.簡單易行HIS標(biāo)簽的應(yīng)用非常簡便,操作步驟明確且不需要特殊的工具或設(shè)備。通過簡單的金屬親和層析技術(shù),就能快速、高效地純化蛋白,適用于高通量篩選、蛋白表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)化等...
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2025-710
蛋白質(zhì)翻譯后修飾(Post-translationalmodification,PTM)對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、功能、穩(wěn)定性和定位等有重要影響。修飾一直以來都是國自然的熱點(diǎn)研究領(lǐng)域,從2021年起國家自然科學(xué)基金委員會(huì)發(fā)布《生物大分子動(dòng)態(tài)修飾與化學(xué)干預(yù)重大研究計(jì)劃》,其中提及的生物大分子動(dòng)態(tài)修飾檢測、泛素化修飾合成和給予蛋白質(zhì)修飾的抗腫瘤新靶標(biāo)鑒定等相關(guān)項(xiàng)目都是重點(diǎn)關(guān)注領(lǐng)域。在2023國自然中,乳酸化、甲基化、泛素化、乙酰化等修飾因其在調(diào)控蛋白質(zhì)功能、穩(wěn)定性、亞細(xì)胞定位以及蛋白質(zhì)間相...
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2025-710
蛋白質(zhì)翻譯后修飾(Proteinpost-translationalmodifications,PTMs)是指蛋白質(zhì)翻譯后通過激酶、磷酸酶等多種酶在氨基酸殘基上添加或去除化學(xué)基團(tuán),從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、功能、穩(wěn)定性和相互作用。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的PTMs類型超過400種,常見的PTMs包括磷酸化(phosphorylation)、糖基化(glycosylation)、甲基化(methylation)、泛素化(Ubiquitination)、乙?;?Acetylation)等。這些修...
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2025-79
dsRNA(double-strandedRNA)即雙鏈RNA,由兩條互補(bǔ)的核苷酸鏈通過堿基配對(duì)形成,它在調(diào)控基因表達(dá)、激活免疫反應(yīng)以及RNA干擾技術(shù)中扮演著關(guān)鍵角色。dsRNA也是某些病毒的遺傳物質(zhì),能夠觸發(fā)宿主細(xì)胞的天然免疫反應(yīng)。dsRNA的形成機(jī)制第一種機(jī)制:基于T7RNA聚合酶(T7RNAP)本身具有的RNA依賴性RNA聚合酶(RdRp)活性,能夠以產(chǎn)物RNA為模板,3'末端繼續(xù)延伸RNA后與原RNA分子反向互補(bǔ)配對(duì)形成發(fā)卡結(jié)構(gòu);或者是在轉(zhuǎn)錄過程中,隨機(jī)斷裂的/不完整...
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